CORTES DE LOS BLOQUES DE PARAFINA

Encender los equipos. Es lo primero que hay que hacer, porque tardan un tiempo en estar listos:

· encender el baño de agua, girando la rueda hasta el valor de 45ºC (el baño debe estar lleno de agua destilada, limpia).

· encender la placa fría para que se vaya enfriando.

Preparar los portas.

Se sacan del dispensador, se limpian con papel y se les aplica una capa de poli-lisina.
Se dejan secar unos 15 minutos (a más, si te pasas un poco con la poli-lisina)

Preparar los bloques.

Los bloques de parafina deben de encontrarse previamente metidos en la nevera para que estén fríos (muy importante para que se puedan cortar bien).
Se colocan sobre la placa fría con la superficie a cortar apoyada directamente en la placa

Colocación de la cuchilla en el microtomo.

Se pueden utilizar cuchillas desechables o reutilizables.
Se coloca en el soporte, y se fijan los tornillos de sujeción, manteniendo un ángulo de 8 º.
Al terminar de cortar, se retira la cuchilla y se limpia con xilol. Las desechables no se tiran cada día, sino cuando ya están melladas o con poco filo.

Colocación del bloque de parafina en el microtomo.

El brazo o cabezal de corte debe de estar lo más retraído posible (o sea, lo menos adelantado posible) para que vibre menos al cortar. Para avance o retroceso del cabezal se utiliza la rueda que hay en el lateral izquierdo del microtomo (siempre con el cabezal levantado).
Se sujeta el bloque de parafina en el microtomo. No se debe apretar demasiado porque se puede romper la parafina, pero sí lo suficiente como para que quede bien fijado y no se mueva al cortar.
En ese momento hay que orientar el bloque de parafina de manera que quede lo más paralelo posible a la cuchilla.

Se mueve el soporte de la cuchilla para acercarlo lo más posible al bloque de parafina
Se afloja la manivela gris situada en la parte superior derecha del bloque del cabezal, lo que deja libre al cabezal.
A continuación, se orienta el bloque utilizando los dos tornillos negros:

Tornillo izquierdo: al avanzarlo (girar hacia derechas) avanza el borde izquierdo del bloque
Tornillo derecho: al girarlo en el sentido de las agujas del reloj el borde superior se retira hacia el fondo.

Una vez orientado el bloque, se inmoviliza el cabezal mediante la manivela gris situada en la parte superior derecha del bloque del cabezal

Obtención de cortes.

Se empieza a cortar con un grosor de 30 m para llegar hasta la zona donde están las muestras de intestino (en nuestro caso).
Tras unos primeros cortes con ese grosor pasamos a 14 m para ver si realmente los cortes engloban ya a las 3 muestras. Cuando esto ocurre se pasa a 6 m para realizar los cortes definitivos.

Recogida de los cortes.

Esos cortes se van pasando, con cuidado, al baño caliente con la ayuda de unos punzones.
Al dejarlos sobre el agua, deben de quedar tan estirados como sea posible.
Se espera unos minutos para que terminen de estirarse, por efecto del calor del agua
Se sumerge el porta en el agua y se sitúa debajo del corte. Luego se va retirando el porta del agua de tal manera que el corte se deposite extendido sobre el porta.
Luego, para que sequen bien, se dejan en una estufa:

Guardar los cortes.

Hasta que se utilicen para teñirlos, los cortes se deben guardar a temperatura ambiente, sin apoyar nada directamente sobre el tejido, y preservados de la luz y el polvo.